Il verde malachite (MG) è un colorante ampiamente utilizzato come colorante per tessuti e colorante biologico. Era anche un fungicida straordinariamente efficace utilizzato nelle operazioni di acquacoltura fino all'inizio del 21st secolo. Il MG è estremamente tossico per pesci e mammiferi e, insieme ai suoi metaboliti, persistono nella carne, rendendola una minaccia per la catena alimentare umana. L'UE ha stabilito che i cibi contaminati con livelli maggiori di 2 μg/g di MG costituiscono un rischio tangibile per la salute e molti Paesi hanno pertanto vietato l'uso del verde malachite come additivo nell'acquacoltura. Nonostante la rigida regolamentazione, i prodotti ittici contaminati da MG continuano a farsi strada verso i consumatori da operazioni illegali che eludono le rigide procedure di controllo e gli standard di sicurezza sanitaria.
Con l'impiego di Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer) per garantire la sicurezza alimentare, è possibile rilevare, in modo rapido e altamente sensibile, la presenza di verde malachite in un formato di analisi facile.
Molte matrici alimentari richiedono complicate procedure di digestione ed estrazione del campione. Questa Application Note descrive che un test dell'acqua molto semplice che può essere eseguito direttamente presso il sito di acquacoltura, per determinare se il verde di malachite viene utilizzato illegalmente come trattamento fungicida.
Per stabilire uno spettro di riferimento per MG, uno standard puro di acqua viene prima analizzato utilizzando nanoparticelle d'oro (Au NPs). Questo spettro SERS unico (Figura 1) può essere utilizzato per creare una voce nella libreria per MG.
Il test simulato di MG nei mezzi di acquacoltura è stato condotto aggiungendo campioni di acqua di flusso con una gamma di concentrazioni di analiti (10 e 1 μg/mL, 100, 10 e 1 ng/mL). I campioni di prova sono stati preparati pipettando 0,1 mL di ciascuna concentrazione di analita (a pH 7,0) in fiale contenenti 0,8 mL di Au NPs e 0,1 mL di 500 mmol/L NaCl. Dopo un'accurata miscelazione, i campioni sono stati inseriti nell'attacco della fiala Misa per l'acquisizione degli spettri SERS.
| Strumento | Acquisizione | ||
|---|---|---|---|
| Firmware | 0.9.33 | Potenza laser | 5 |
| Software | Misa Cal V1.0.15 | int. Ora | 1 s |
| Misa Fiala Allegato | 6.07505.040 | medie | 10 |
| Kit di identificazione - Au NP | 6.07506.440 | Raster | SU |
Spettri sovrapposti in figura 2 ad ogni concentrazione di MG mostrano una chiara rilevazione fino a 1 ng/mL.
Rilevamento di verde malachite in campo
Riempi a metà una fiala pulita con Au NPs. Usando le pipette, aggiungi 2 gocce ciascuna di mezzo di acquacoltura e soluzione di NaCl ad Au NPs, tappa e agita delicatamente la fiala per mescolare. Inserisci nell'attacco della fiala su Misa per la misurazione.
| Kit ID - Au NP | 6.07506.440 |
|---|---|
| include: | Nanoparticelle d'oro (Au NP) |
| Notizia in anticipo | |
| Pipette monouso | |
| Fiale di vetro da 2 ml | |
| Reagenti | |
| soluzione di NaCl | 3 g di NaCl in 100 ml di acqua |
| Impostazioni di prova | Utilizzo Kit ID OP su MISA |
Il rilevamento altamente sensibile di MG in una matrice di test potenzialmente difficile è ridotto a un test molto semplice con Misa e Au NPs. Questa analisi richiede una formazione minima dell'utente e può essere eseguita in loco per applicazioni di test rapide e ad alta produttività. Il limite inferiore di MG riportato qui è accurato anche al di sotto della soglia per i livelli consentiti negli alimenti contaminati e si confronta favorevolmente con il limite di rilevamento recentemente riportato per MG nei mezzi di acquacoltura commerciali.
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