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El tiram se utiliza ampliamente como fungicida y parasiticida para prevenir enfermedades en los cultivos y como repelente de animales para proteger los árboles y las plantas ornamentales. Sin embargo, amplios estudios toxicológicos concluyen que la exposición crónica de alto nivel puede causar daños considerables a los órganos de especies terrestres y acuáticas. Si bien solo es moderadamente tóxico para los humanos a través de la exposición de la piel y la ingestión, el tiram es altamente tóxico si se inhala. Para reducir sus efectos negativos sobre la salud y el medio ambiente, EE. UU. define límites máximos de residuos que varían para diferentes cultivos alimentarios. Por el contrario, la Unión Europea prohibió recientemente el tiram y está pasando a utilizar plaguicidas que conllevan riesgos reducidos para la salud.

Con Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer), la detección de bajos niveles de tiram en las manzanas se logra con flujos de trabajo guiados que se han adaptado para el uso mediante diversos probadores. El software Misa Cal procesa automáticamente los resultados y logra la identificación química al compararlos con bibliotecas espectrales propietarias, creadas por el usuario o disponibles comercialmente. Los resultados se pueden etiquetar geográficamente y compartir de inmediato con la información sobre peligros químicos que los acompaña.

Esta nota de aplicación describe un procedimiento de prueba simulado para detectar residuos de tiram en piel de manzana. El ensayo se basa en la adquisición de espectros específicos de SERS para tiram utilizando los sustratos P-SERS de plata patentados de Misa y Metrohm Raman.

Para establecer un espectro de referencia, se analizó un estándar de tiram puro a una concentración de 500 μg/mL en etanol utilizando tiras de plata (Ag) P-SERS. El espectro SERS único que se muestra en Figura 1 se puede utilizar para crear una entrada de biblioteca para thiram.

Figure 1. Espectro de referencia SERS estándar de tiram.
https://s7e5a.scene7.com/is/image/metrohm/195000010_1?ts=1711365834967&dpr=off

Para simular una prueba rápida, se aplicaron alícuotas de 25 μL de 1000, 100 y 10 μg/mL de tiram en etanol a 2 cm2 secciones de pieles de manzana lavadas con agua y secadas. Después del secado completo de las secciones de prueba, las tiras de prueba Ag P-SERS se sumergieron en etanol y se frotaron inmediatamente con un movimiento circular dentro de las secciones tratadas en la piel de la manzana. Cada tira se secó durante cinco minutos y luego se colocó en el accesorio P-SERS en Misa para la medición.

Tabla 1. Parámetros experimentales
Instrumento Adquisición
Firmware 0.9.33 Potencia del láser 5
Software Misa Cal V1.0.15 Int. Time 5 segundos
Misa vial Attachment 6.07505.030 Promedios 10
ID Kit - Ag P-SERS 6.07506.470 Raster ON

Los espectros superpuestos y corregidos de línea base adquiridos para hisopos de una piel de manzana tratada con diferentes concentraciones de tiram muestran una detección de hasta 10 μg/mL (Figura 2).

Figure 2. Los espectros corregidos de línea base superpuestos adquiridos de hisopos Ag P-SERS muestran la detección de tiram en pieles de manzana a 10 μg/mL.

Detección de tiram en el campo

Sumerja el extremo impreso de una tira P-SERS en etanol. Toque solo el lado posterior sin imprimir del hisopo con las manos enguantadas. Use el lado impreso humedecido de la tira para frotar la cáscara de una manzana. Frote la tira con un movimiento circular. Después de secar durante 5 minutos, inserte la tira Ag P-SERS, con la parte impresa hacia abajo y hacia el instrumento, en el accesorio P-SERS para realizar la medición.

Tabla 2. Requisitos para el protocolo de prueba de campo
Kit de identificación - Ag P-SERS 6.07506.470
incluye: Plata P-SERS
Cucharón
Pipetas desechables
viales de vidrio de 2 ml
Reactivos Etanol
Configuración de prueba Utilizar Kit de identificación OP en MISA

Misa es un sistema altamente sensible y rentable para la identificación inequívoca de residuos de plaguicidas en la fruta. Sus análisis fáciles de usar combinados con software inteligente en un formato compacto y portátil lo convierten en una solución poderosa para la detección de adulterantes de alimentos en el campo.

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